犬细小病毒感染的流行病学调查及防治措施

陶 群

(建湖县上冈镇农业农村局,江苏 盐城 224700)

1.1 病原分类

犬细小病毒疾病病原属于细小病毒科,细小病毒属,与猫的泛白细胞减少症疾病病原同属细小病毒亚群。

1.2 病原生物学特征

CPV为负链单股的DNA病毒,无囊膜,病毒粒子呈二十面体立体对称,直径18~26nm,基因组全长5323bp,有三种衣壳蛋白:VP1、VP2、VP3。基因组包含两个开放式阅读框(ORFs),分别编码非结构蛋白NS1、NS2和结构蛋白VP1、VP2。VP3蛋白存在于成熟的CPV病毒中,是VP2的裂解物,它只出现于衣壳装配后和包装后的基因组中。

1.3 犬细小病毒的理化性质及培养特性

CPV主要在有丝分裂旺盛的细胞中繁殖,如老龄动物的淋巴系统和幼龄动物的许多组织。它能在犬猫肠肺肾的原代和传代细胞中很好地增长,也能在貂肺、牛睾丸等细胞中增殖。37℃下培养3~4d即可出现细胞拉长、破碎、脱落等病变,传代细胞同步接毒或是在有40%~50%细胞贴壁时接毒是提高CPV分离率和病毒滴度的传统方法。

2.1 犬细小病毒的宿主范围及传播途径

高度接触性是CPV的主要特征,犬科、猫科动物不分年龄都可以感染。患病犬及治疗好后的携带细小病毒犬是健康犬感染的主要传染源,通过排粪、排尿、口水向外排毒,易感染的犬则通过间接接触或直接而感染。

2.2 犬细小病毒的致病机理

感染是由病毒的入侵所致,最小感染剂量未知,但似乎非常小,甚至小至100个TCID50/g。病毒入侵后在感染的头两天,病毒在口咽部复制,通过血流转播到其他器官,3~5d后出现病毒血症,虽然肠道病变严重,但其感染是全身性的,病毒通过血流感染而不是通过肠腔进入肠黏膜。

对于病毒入侵细胞的机制,有研究显示,健康犬经消化道感染病毒后,病毒主要攻击两种细胞,一种是肠上皮细胞,一种是心肌细胞,分别表现胃肠道症状和心肌炎症状,心肌炎以幼犬多见。

3.1 犬细小胞病毒病的常见临床症状

犬细小病毒病在临床症状上体现两种发病型:急性出血性肠炎型和心肌炎类型。

心肌炎型:心肌炎型细小一般发生在大约40d的幼犬身上,而最初的疾病一般没有明显的症状,看上去很健康,一旦发作,就会由于心脏功能不全、心力衰竭、呼吸困难而死亡,从发病到死亡的时间很短,有时甚至来不及抢救。然而,一些犬只会出现轻度腹泻的早期症状,如果及时治疗,也许能挽救生命。

肠炎型症状:肠炎细小病毒可在犬体内潜伏7~14d,然后犬的体温会立即上升至39.5~40.5℃,出现情绪低落、拒食、呕吐、腹泻等症状。在疾病的早期阶段,呕吐物是刚刚被吞进肚子的食物,然后随着病情的严重,呕出黄绿色的黏液,有时还伴有血。此外,在疾病开始时,狗的排泄物呈浅黄色,随着疾病的发展,粪便变成褐色或番茄色,排便次数明显增加,粪便也带有一种特殊的臭味。一般来说,根据呕吐物和番茄颜色的血便,狗可以被诊断为细小疾病。如果你继续让狗狗腹泻,狗狗会严重脱水,眼球塌陷,皮肤失去弹性,体重下降,导致休克、昏迷和死亡。小狗患有肠炎型细小病,如急性发作,在1~2d内死亡;
如慢性发作,发病过程可长达1周。

3.2 犬细小病毒病的剖检病理变化

犬细小病毒病的病理变化:出血性肠炎病犬的剖检病变是十二指肠和空肠充血、水肿,浆膜出血,肠腔内还有红色的水样物,回肠也有类似的变化。淋巴结和胸腺充血、出血。组织学检查时可见小肠黏膜上皮坏死和脱落,绒毛萎缩,隐窝萎陷或扩张,或数减少。肠管与膀胱上皮细胞内有核内包涵体;
心肌炎病犬的剖检病变为肺严重水肿,浆膜出血,心肌和心内膜有非化 脓性坏死灶,心肌纤维弹力降低、水肿,并伴有出血斑纹,心肌病变细胞内 有核内包涵体。诊断:根据本病的临床症状、流行特点和病理变化,可作出初步诊断。但对初发病例必须进行实验室诊断,其中包括病毒分离鉴定,血凝和血凝抑 制试验(此法是近年来在临床上常用的特异、简便的诊断方法)、荧光抗体试验等。在诊断时应与犬瘟热、犬传染性肝炎、犬冠状病毒病、犬轮状病毒病加 以鉴别。

4.1 犬细小病毒病的临床综合诊断要点

4.1.1 根据流行特点

本病虽然全年各时期均可发生,但多出现于温度变化较大的时期。满月断奶的小犬一般体现为心肌炎为主要病症,而其他时期犬多以肠炎为主要临床症状症。本病潜伏期为7~14d,病程4~7d或更长。该病全年都有发生,但2~4月份及即将入冬时期较多发,心肌炎型主要以3~4周龄的幼犬为主。饲养管理条件骤变或恶劣,长途运输,季节变换,温度突变等都可增加该病的发病率和病死率,恶化病情,加剧症状。

4.1.2 根据临床症状

对于肠炎型的病犬,一般先呕吐后腹泻,粪便恶臭呈黄色或酱油色,内涵多量黏液及肠脱落物,病后2~3d粪便中出现血液,体温由最初的升高降至正常,病犬呈脱水状,精神萎靡,食欲废绝。

而对于心肌炎型的病犬,多出现呼吸困难的症状,心悸亢进,并伴有呻吟,可视黏膜苍白,体质衰竭。

4.1.3 根据病理剖检变化

犬细小病毒病的病理变化:出血性肠炎病犬的剖检病变是十二指肠和空肠充血、水肿,浆膜出血,肠腔内还有红色的水样物,回肠也有类似的变化。淋巴结和胸腺充血、出血。组织学检查时可见小肠黏膜上皮坏死和脱落,绒毛萎缩,隐窝萎陷或扩张,或数减少。肠管与膀胱上皮细胞内有核内包涵体;
心肌炎病犬的剖检病变为肺严重水肿,浆膜出血,心肌和心内膜有非化 脓性坏死灶,心肌纤维弹力降低、水肿,并伴有出血斑纹,心肌病变细胞内 有核内包涵体。诊断:根据本病的临床症状、流行特点和病理变化,可作出初步诊断。但对初发病例必须进行实验室诊断,其中包括病毒分离鉴定,血凝和血凝抑 制试验(此法是近年来在临床上常用的特异、简便的诊断方法)、荧光抗体试验等。在诊断时应与犬瘟热、犬传染性肝炎、犬冠状病毒病、犬轮状病毒病加 以鉴别。

4.2 犬细小病毒病的实验室诊断方法

临床诊断:根据发病动物的临床症状并结合细小病毒病的流行特点,病犬同时具有细小病毒病典型病症三种或三种以上可初步判定为细小病毒病。

血液常规检测:采集病犬静脉血液,经预处理后,应用血细胞分析仪对血样进行检测,分析整理所得数据。

用上述临床诊断方法,仅可对该病作出初步诊断,若要确诊,需进行实验室诊断,目前主要的方法如下:

4.2.1 血常规检查

血液常规检查血液中红、白细胞数量,及粪便中潜血检查,可以作为本病诊断的参考。

4.2.2 PCR检测

最新研究成果显示:建立可检测CPV病原的巢式PCR诊断技术,可不与犬流感病毒、狂犬病病毒。犬瘟热病毒、犬腺病毒发生交叉反应,能检测到10-9的CPV总RNA量,具有特异性强、灵敏度高、稳定性好的特性,但需要昂贵的仪器和试剂,操作烦琐,检测成本高,临床应用较少。

4.2.3 ELISA抗体试剂盒检测方法

ELISA方法有操作简便、快速、灵敏,可以同时检测大批量样品等特点,且不需要太昂贵的试验设备,故此法为该病大规模普查的首选方法。

4.2.4 采用CPV试剂盒快速诊断

该方法为实践中简单快捷的常用的确诊方法,大致操作如下:用棉签沾湿后在病犬粪便或肛门中取样,将棉签浸入装有样品的试管中,充分混匀后,用一次性滴管取上清液,滴到CPV检测板上,5min后若在对照区和检测区均出现红色带,则结果为阳性;
若仅在对照区有红线,则结果为阴性。目前该法技术成熟,成本适中,被动物医院甚至许多养犬者广泛使用。本疫控中心对该病诊断即选用此方法。

4.3 犬细小病毒病的临床治疗

本病的治疗原则是以支持疗法配合特异性治疗为主,并以对症治疗和控制继发感染为辅。

4.3.1 支持疗法

病犬禁食,每天至少输液1次,必要时每天2次,连用5~7d。以能量合剂补充病犬维持生命所需能量;
输钾以治疗病犬因多日不食引起的钾失衡;
静滴碳酸氢钠以缓解后期因长期未进食引起的酸碱平衡紊乱,防止酸中毒。

4.3.2 特异性治疗

应用犬细小病毒高免血清或细小病毒单克隆抗体,1ml/kg,肌肉注射,1次/d,连用3~5d。也可二者联合应用。

以上结果显示联合应用高免血清和单克隆抗体;
治疗效果最佳,而不应用特异性治疗的病犬病死率极高。

4.3.3 对症治疗

对于顽固性呕吐的病犬,肌注爱茂尔、阿托品;
应用磺胺脒2g、药用炭2g、安普霉素1g、云南白药2g、止血敏2g深部灌肠以止泻。VK1、VK2用于止血。

4.3.4 控制继发感染

氨苄青霉素50mg/kg与丁胺卡那霉素10mg/kg联用疗效确切。

4.3.5 犬细小病毒病的免疫

CPV最低抗体保护值为1:80。使用的免疫程序如下:对于1周岁以下的犬,应用犬瘟热、犬细小病毒二联疫苗或犬瘟热、细小病毒、传染性肝炎、副流感四联疫苗,刚断奶后首免,间隔2~3周免疫1次,再间隔2~3周再免疫1次,以后每年免疫两次。对于1周龄以上的犬,用上述疫苗每年免疫两次,间隔2~3周。

(1)虽然目前CPV的高免血清和单克隆抗体已经非常普及,但就治愈率来讲,如果病犬小于1周岁,并且没有特别及时地送往专业医院治疗,即使联合应用血清及单克隆抗体,治疗效果也不容乐观。除此之外,心肌炎型的病犬多呈急性经过,而且应激反应强烈,故诊断和难度往往大于肠炎型病犬。

(2)1岁以上的犬,患细小病毒病的概率最低,而5周龄以上1岁以下的幼犬发病率最高,这也就验证了综述部分的对于不同年龄的犬发病率不同的理论。5周龄以内的幼犬发病率明显低于5周龄以上1岁以下的幼犬的原因应符合上面论述过的理论,即断奶前的幼犬,可以通过哺乳,获得母源抗体,从而降低了该病的发病率,而哺乳停止,母源抗体消失,自身免疫机制还未建立的幼犬是该病主要的感染对象。

(3)对于CPV主要的感染对象往往是纯种犬的问题,目前还没有相关研究结果可以解释。笔者认为,人们饲养的纯种犬通常必须从狗市或者宠物商店才能购得,而这些商人的意识及道德缺失,应该是造成纯种犬患细小病毒病概率高的原因之一。

(4)由于患病犬的就诊时间不同,导致在开始检测时病犬处于不同的病程及感染状态,故各受检样品间数据差异很大。另外,犬细小病毒病程中白细胞数量整体呈下降趋势,其途中升高者,是由于继发细菌感染,激活机体免疫系统所致。

(5)临床实践证明,应用在治疗部分提及的中药配方,配以西药特异性疗法并适当支持治疗,可提高该病的治愈率。方中:大黄、黄连、黄柏、黄芩有杀菌抗病毒、清热化湿,涩肠止痢等功效,并能提高机体免疫力,地榆、田三七、乌贼骨、白芨、生蒲黄等对消化道均有止血作用;
白头翁则能清热燥湿、凉血止痢、吸收消化道毒物,减轻肠道负担;
甘草则调和诸药。西药特异性治疗,辅以中药调节机体平衡,增强自身免疫力,这种方法有望在临床实践中得以普及。

(6)犬细小病毒病的发病初期,往往仅表现出精神不振,食欲降低或废绝,体温升高,很难与其他疾病如感冒,犬瘟热等病相区分,因此很多畜主从经济方面考虑而放弃进行CPV试剂盒诊断,从而贻误了最佳治疗时机。而细小病毒病的治疗时机最为关键,一旦错过,则治疗难度增大数倍。这是造成该病治愈率不高的主要原因。

由于笔者临床有限,接诊病例的数量有限,所得数据不能非常精确地揭示客观规律,但通过对这有限的数据加以统计分析,所得的结论对兽医工作者在细小病毒病方面的临床工作也有一定的借鉴意义。

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